肉苁蓉作为一种大家都比较熟悉的滋补类型的产品，目前在市场上的受欢迎程度也是值得肯定的，有的人表示，自己得知正确服用肉苁蓉可以解决很多方面的问题，那么，肉苁蓉的功能到底有哪些呢？下面就来对具体的功能做了解。第一、润肠通便肉苁蓉里面的成分能够帮助改善肠蠕动，在抑制身体里面大肠水分吸收上也是有很不错的效果的，它能够帮助缩短使用者的排便时间，所以，在帮助排毒上作用也比较理想，如果有便秘问题，那么，患者可以使用肉苁蓉来满足自己的润肠通便需求。第二、对抗衰老经常是一些肉苁蓉能够让自己的体力增加，而且，也能够让服用者身体的耐力和对抗疲劳的效果因此增强，同时，它还能够让身体衰老状态得到改善，在帮助恢复老年人的精力、身体活力和体力方面都有很不错的效果。第三、保护心脑血管和肝脏很多人在天气比较冷的情况下就会出现手脚冰凉，这时候吃一点肉苁蓉能够让微循环得以改善，而且，肉苁蓉里面的成分还能够改善心肌缺血，也有降低血脂的效果，如果有动脉粥样硬化或者是血栓问题，就可以使用它来辅助改善。第四、补肾壮阳肉苁蓉的补肾壮阳效果是不错的，它能够帮助肾脏维持健康，同时也能够让男性朋友的肾虚问题得到改善，这样一来，自然也就能够确保在同房能力上变得更给力一些。上面就是肉苁蓉的功能的简单介绍，如果想要吃肉苁蓉来满足自己的服用需求，那么，在吃肉苁蓉的时候量就必须要注意把握好，否则就可能会因为自己吃肉苁蓉的量太大而导致滋补过剩，出现滋补过剩也很容易给自己的身体造成不好的影响。

肉苁蓉是一种常见的中药材，但它的作用不仅仅是可以入药，其实平时也可以食用，这对于身体健康有着较大的好处，其实平时生活中可以利用肉苁蓉进行身体的保健。虽说肉苁蓉常见，但是对于很多的功效，大家并不是特别了解，到底肉苁蓉的功效与作用有哪些?1、增强身体免疫肉苁蓉当中含有肉苁蓉多糖成分，这种成分对于身体有着较大的好处，及时通过补充之后，能够就人体淋巴细胞的形成以及活性产生较大的影响，可以增加淋巴细胞的增长反应，综合作用之下可以提高身体免疫并且可以增加糖原储备，减少运动后肌肉的蛋白分解疲劳。2、补肾益精血肉苁蓉作为一种中药材，其中包含较为丰富的生物碱、氨基酸、维生素以及多种微量元素，能够对人体最好的吸收以及利用就能够补充身体所需要的营养元素，但是之后还能够男性的肾脏以及精子生成提供必要的营养，有着不错的补肾益精壮阳的效果。3、延缓衰老在肉苁蓉当中含有多种营养物质，而其中比较突出的苯炳醇糖物质通过对人体吸收之后可以起到良好的延缓人体衰老的的作用，当身体内这一成分的含量浓度较高，能够延缓衰老，并且对于胸腺以及人体下脑垂体的老化有较好的缓解作用。虽说肉苁蓉有着综合调理身体健康的作用，通过服用之后能够补充人体所需要的多种营养元素但是却不是可以随意服用的产品。通常情况下，若是自身属于阴虚火旺的体质，不宜服用肉苁蓉避免加重自身火旺。同样也需要注意的是，虽然肉苁蓉滋补效果比较好，但是未成年人已经处于孕期的女性身体处于比较特殊的阶段，也是不宜服用的，不然很有可能影响到胎儿的健康。想要有保健的功效，需要按照正确的用法用量进行服用，并非随意乱服用。

肉苁蓉为较常用中药。始载《神农本草经》，列为上品。别名：淡大云、甜大云、寸云。来源：为列当科多年生寄生草本植物苁蓉的干燥肉质茎。野生产于湖边沙地的琐琐林中，寄生于琐琐的根上。产地：主产于内蒙古、宁夏、甘肃以及新疆等地区。性状鉴别：肉苁蓉呈不规则扁圆柱形，略弯曲，或呈段块状。长10~20厘米，直径3~5厘米。表面暗棕色或棕褐色，密披鳞片状肉质叶片或残基，呈夏瓦状排列。质坚而稍有韧性，不易折断。断面淡棕色至棕黑色，深浅不一，有辐射状花纹，中央有髓心，有时中空。显肉性。气微，有酱样气味，味微甘。以肉质茎粗壮肥大，密披鳞叶，表面棕色内碴棕黑色显油润者为佳。主要成分：含微量生物硷，并有结晶性中性物质。又有报告谓含甙类和有机酸样物质。功效与作用：滋肾益精、壮阳滑肠，其作用为强壮、通便。附：水浸液对实验动物有降低血压作用，又能促进小鼠唾液分泌。炮制：加黄酒蒸透后，切片晒干。性味：甘、温。归经：入肾、大肠经。功能：益精血、补肾助阳、滑肠通便。主治：男子阳痿，女子不孕，腰膝冷痛，血枯便秘等症。临床应用：1、治疗肾虚患者，补阳滋阴都一定作用，对肾虚型神经衰弱，有精神不振、体倦、腰酸、健忘、听力减退的患者，尤以适宜。常配杞子、五味子、麦冬、黄精、玉竹等。又可治肾虚阳痿、早泄、妇女不孕，崩漏带下，竣补之力虽不足，但药性温和，配伍补骨脂、菟丝子、沙苑子、山茱萸肉厚，仍能发挥壮阳作用。2、治老人气虚、血虚所致的便秘。一般可用肉苁蓉煮猪肉汤服，血虚便秘配当归、生地、火麻仁、方入苁蓉润肠汤；虚秘而汗多、小腹不适，需配沉香。使用注意：1、一般补阳物多燥，滋阴物多腻，但肉苁蓉补而不燥，滋而不腻，其力不缓，故有苁蓉（与“从容”谐音）之称，兼有表证的肾虚患者也可用；2、一般用淡苁蓉，偶尔用咸苁蓉，取其有固涩作用，治小便频数和滑精；3、大便溏泄、实热便秘者不宜用。用量：6~18g。治便秘常用12~18g。处方举例：从容润肠唐：肉苁蓉15g，当归12g，生地9g，白芍9g，火麻仁9g，水煎服。注：除上述淡苁蓉外，产地尚生产一种盐苁蓉，即将采集的鲜苁蓉投放于盐池内浸渍2~3年，取出晒至6~7成干即可。盐苁蓉又名盐大云，形态与淡苁蓉相似，唯表面黑褐色，外披黄褐色盐霜，质柔韧，易折断，断面黑棕色或黑色。气微，味极咸。主销华东及中南地区。一般在冬季用清水漂洗至无咸味后，切片晒干使用，效用与淡苁蓉相同。肉苁蓉的原植物据《中药志》记载有苁蓉、迷肉苁蓉和肉苁蓉三种；但近年文献技术的拉丁学名、中文名称、图谱上的形状、以及以哪一种为主，尚不统一，还有待有关单位调查确定。

如何科学进补？广州医科大学附属中医医院肾病科主任中医师赵威推荐用肉苁蓉煲汤，因其补肾阳、益精血、阴阳双补，药性从容和缓，为临床平补阳药之一。肉苁蓉， 被《神农本草经》列为滋补上品。内蒙古自治区西北部乌拉特后旗戈壁地区出产的肉苁蓉个大、肉厚、味甜，素有“沙漠人参”之美誉。肉苁蓉性温味甘咸， 归肾、大肠经。《本草汇言》述：“肉苁蓉，养命门，滋肾气，补精血之药也。男子丹元虚冷而阳道久沉，妇人冲任失调而阴气不治， 此乃平补之剂，温而不热，补而不峻，暖而不燥，滑而不泄，故有从容之名。”现代研究发现，其可以缓解便秘，调节内分泌，促进中枢神经功能，提高吞噬细胞活力，增强人体免疫力。但应注意不要用铜、铁器烹饪，且胃肠虚弱，泄泻者禁用；肾中有热，强阳易举，精不固者忌之。下面给大家推荐一款食疗方——肉苁蓉羊排汤。食材：肉苁蓉20克，羊排500克，红枣5颗，姜3片。做法：肉苁蓉除去杂质，洗净切厚片。羊排洗净砍段放入沙锅中，适量翻炒，加入清水大火烧开，去除血沫，放入肉苁蓉、红枣、姜片，炖煮1.5小时至羊排软熟，即可调味服用。功效： 补肾壮阳， 益精补血，强筋健髓。用于肾阳不足，精血亏虚之阳痿、遗精、腰膝冷痛、宫冷不孕等症。

摘要：建立微波消解-电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法同时测定肉苁蓉及其饮片中锶、铬、钴、镍、铜、锌、铅等7种无机元素含量的方法。以硝酸-高氯酸-氢氟酸为消解体系对样品进行微波消解，采用ICP-MS法同时测定。方法学验证表明：7 种元素均在0～500 μg/L 的质量浓度范围内线性关系良好（r2＞0.999）；检出限在0.0031～0.0720μg/L；低、中、高3 种浓度水平，7种元素的平均回收率（n=3）在93.75%～105. 0%之间，重复性RSD（n=6）在1.2%～3.4%之间。结果表明，肉苁蓉确为一种矿质元素含量丰富且安全性较好的药品及功能保健食品（原料）；其中肉苁蓉药材：Sr＞Cu＞Ni＞Pb＞Co＞Cr＞Zn；肉苁蓉饮片：Sr＞Zn＞Cu＞Pb＞Ni＞Co＞Cr；可见肉苁蓉经过加工处理成饮片，其无机元素含量变化比较大。为肉苁蓉的综合质量评价、营养价值评价、制药工艺及科学合理施肥等提供一定参考。关键词：肉苁蓉；肉苁蓉饮片；电感耦合等离子体质谱法；无机元素肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉Cistanchedesrtico⁃laY.C.Ma 或德赢vwin登录 Cistanchetubulosa（Schenk）Wight 的干燥带鳞叶的肉质茎，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效，是一种应用价值很高的传统中草药，素有“沙漠人参”之美誉，主产于内蒙古、新疆、宁夏、甘肃和青海等西北地区[1-2]。现代药理学研究表明肉苁蓉具有延缓衰老、抗疲劳等作用[3]；临床上主要用于肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力等症，为常用的补肾壮阳药[4]；最新研究发现肉苁蓉很可能成为抗阿尔兹海默病的新药，也可能被应用于中老年神经退行性疾病等新型药物的开发。关于肉苁蓉成分研究较多，但是关于肉苁蓉中微量元素的检测研究较少。微量元素在中药材中普遍存在，既为植物组织结构的组成部分，也是中药发挥药效治疗疾病的有效成分。现代营养学中微量元素是生活中必不可少的，同时微量元素可增强药效，如锌（Zn）、锶（Sr）、钴（Co）在人体内不仅具有生物活性，还参加人体合成和代谢生物大分子（如合成核苷酸、生物酶等）；肉苁蓉及其饮片中微量元素含量的检测对于研究中药材的道地性和质量具有重要指导意义[5-9]。同时，有毒元素的含量还可作为评价中药材质量的指标。中药饮片与传统的中药相比较，具有携带方便，免称量、清洗的麻烦，增加了用药顺应性[8]。但是肉苁蓉药材经过生产加工，制备成饮片，其无机元素含量是否存在差异，还尚未见报道，对比分析检测肉苁蓉及其饮片中无机元素含量及其变化规律对于肉苁蓉综合开发利用，药食同源等方面都会有非常重要的作用。电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）是近年来发展迅速的一项技术，具有灵敏度高、准确性好、精密度高、检出限低、线性范围宽、易于同时进行多元素分析等优点[10-18]。本文将采取电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）技术测定肉苁蓉中药及其饮片中7种微量元素的含量并进行比较分析。实验部分仪器与试药XSeries2 型电感耦合等离子体质谱仪（美国Thermo Ecemntal公司），EX12001ZH 型电子分析天平（美国奥豪斯仪器有限公司），Milli-Q B型超纯水装置（美国MIKKIPORE公司）。所有玻璃仪器均以铬酸洗液浸泡过夜，再以去离子水彻底冲洗后备用。锶（Sr）单元素标准溶液（1000mg·L-1，批号为GSB04-1767-2004，国家有色金属及电子材料分析测试中心）；铬（Cr） 单元素标准溶液（1000mg·L-1，14040931，国家标准物质研究中心）。钴（Co）单元素标准溶液（1000mg·L-1，GSB04-1722-2004，国家有色金属及电子材料分析测试中心）。镍（Ni） 单元素标准溶液（1000mg·L-1，B1802007，国家标准物质研究中心）。铜（Cu）单元素标准溶液（1000mg·L-1，GSB04-1725-2004，国家有色金属及电子材料分析测试中心）。锌（Zn）单元素标准溶液（1000mg·L-1，GSB04-1761-2004，国家有色金属及电子材料分析测试中心）。铅（Pb）单元素标准溶液（1000mg·L-1，B003036，国家标准物质研究中心）。氩气纯度为99.999%；盐酸、硝酸、高氯酸、氢氟酸为优级纯；试验用水为超纯水（电阻率18.25MΩ·cm-1）。肉苁蓉、肉苁蓉饮片来源于酒泉市中医院，原产地均为甘肃省。1.2 标准溶液制备精密量取各单元素标准溶液适量，以2% 硝酸溶液稀释，制成Cr浓度为0、1、5、10、50、100 μg/L 的标准工作溶液，Sr、Co、Cr、Ni、Cu、Zn、Pb的浓度分别为0、10、50、100、500μg/L 的混合标准工作溶液。1.3 内标溶液的制备分别精密量取Ge、In、Rh 标准溶液0.5 mL 于50 mL 容量瓶中，用2% 硝酸定容到50 mL，得到质量浓度为10 mg/L 的混合内标储备溶液；再将内标储备溶液用2% 硝酸稀释10 倍，得到Ge、In、Rh混合内标使用溶液，质量浓度均为0.5 mg/L。1.4 供试品溶液制备取肉苁蓉药材、肉苁蓉饮片样品用自来水冲洗后，分别用去离子水冲洗、烘干、粉碎、过筛（100目），恒重后置于干燥器中备用。分别精密称取样品0.2000g 细粉于聚四氟乙烯消解罐中，精密加入10mL硝酸-高氯酸-氢氟酸（8+2+3），摇匀，静置至气泡散尽，置微波消解系统内消解。微波功率1000W，温度在25 min 内由室温升至200℃，维持22分钟，待消解完全后冷却至室温。取出消解罐，在通风橱中将酸挥尽，将消解液转移至容量瓶中，用去离子水洗涤消解罐与盖子3次，合并洗液于容量瓶中，用2%稀硝酸定容至25mL，待测。实验方法与结果2.1 工作条件高频发生器输出功率1550 W；等离子体流量15.0 L/min；辅助气流量0.8 L/min；载气流量1.1 L/min；碰撞气（氦气）流量4.3 L/min；射频1.8V；炬管水平位置-0.5mm；雾化室温度2℃；蠕动泵转速0.1 rps；扫描方式调谐模式He；重复采集次数3次；炬管水平位置0.5 mm；溶液稳定时间40s ；积分时间0.30 s；氧化物1.58% ；采样深度10.0mm。对样品进行检测时，内标进样管始终置于内标溶液中，同时样品管需插入浓度由低到高的对照品溶液中，依次测定。重复测定3次，取平均值。方法学考察2.2.1 线性关系及检出限取“2.1”项下混合标准工作溶液，按“2.4”项下工作条件依次测定，以标准品质量浓度为横坐标，测量值与内标值的比值为纵坐标，绘制标准曲线，得到各元素的回归方程及相关系数（r）。对样品空白溶液连续进行11次平行测定，以标准偏差的3倍计算检出限（3s）。各元素的线性参数和检出限见表2。7种元素相关系数均大于0.999，说明线性相关系数良好，满足标准曲线线性相关系数的要求。2.2.2 精密度试验取“2.1”项下混合标准工作溶液，连续进样6次，计算得各元素的RSD 为1.1%～3.2%（见表1），表明该方法精密度良好。2.2.3 重复性及稳定性试验精密称定肉苁蓉样品R1 约0.2000 g，按“2.3”项下方法平行制备6 份供试品溶液，测定，计算质量分数，各元素RSD 为1.2%～3.4%，表明该方法重复性良好。该样品分别于0、1、2、4、6、8、10、12 h 进样测定，结果各元素的RSD 为0.5%～2.1%，表明供试品溶液于室温12 h 内稳定性良好。2.2.4 加样回收试验精密称定肉苁蓉、肉苁蓉饮片样品0.2000 g，分别加入适量低、中、高三水平的单元素标准溶液，按“2.3”项下方法平行制备试样，上机测定，通过计算各元素的加标回收率和相对标准偏差（RSD）来确认方法的准确性与精密度，结果见表3和表4。三份样品的加标回收率在93.75%～105. 0% 之间，表明所测定元素都获得了良好的回收率，所建立的方法准确可靠且精密高。样品含量测定按建立的方法进行分析，每个肉苁蓉药材（编号为R1、R2 、R3）、肉苁蓉饮片（编号为Y1、Y2 、Y3）样品均重复测定3次，，测定其样品中Sr、Co元素的含量，结果见表5。3 结果分析3.1 本研究采用微波消解ICP-MS 法首次同时测定肉苁蓉药材和肉苁蓉饮片中7种无机元素含量的方法，并将其含量进行对比分析。所建立的方法样品预处理简单，测定结果准确可靠，适用于肉苁蓉及肉苁蓉饮片中无机元素测定及有害元素评估，能够为肉苁蓉的综合质量评价、营养价值评价、制药工艺及科学合理施肥等提供一定参考。人体正常新陈代谢需要微量元素的参与，其中Zn、Cu、Cr为人体必需矿质元素，Co、Ni、Sr在中药材功效物质形成和疗效发挥方面发挥着重要的作用。本研究发现，肉苁蓉中含有丰富的矿质元素，肉苁蓉药材中Sr＞Cu＞Ni＞Co＞Cr＞Zn；肉苁蓉饮片：Sr＞Zn＞Cu＞Ni＞Co＞Cr。Sr 元素在肉苁蓉药材和饮片中含量均较高，尤其是在饮片中，含量达到221.4μg/g，锶元素具有促进成骨细胞的生成，影响神经肌肉的兴奋过程，刺激人体骨骼生长，在骨生成中发挥着重要作用；人体较易缺乏的Zn 微量元素含量次之；钴是动物体内形成维生素B12 的重要组成；Cu、Cr 虽为人体必需矿质元素，但超过安全限度也会蓄积中毒而危害人体健康，肉苁蓉中Cu、Cr含量符合国家相关规定。综合来看，肉苁蓉确为一种矿质元素含量丰富且安全性较好的药品及功能保健食品（原料）。3.3 比较肉苁蓉药材与饮片中无机元素中7 种重金属元素Cr、Co、Ni、Cu、Zn、Sr、Pb平均含量。肉苁蓉药材：Sr＞Cu＞Ni＞Pb＞Co＞Cr＞Zn；肉苁蓉饮片：Sr＞Zn＞Cu＞Pb＞Ni＞Co＞Cr；可见肉苁蓉经过加工处理成饮片，其无机元素含量变化比较大。3.4 从实验结果可看出，肉苁蓉药材中Cu＞Pb＞Cr，肉苁蓉饮片中Cu＞Pb＞Cr，其重金属含量的规律具有一致性。2015 年版《中华人民共和国药典》规定中药材重金属元素限量为：Cu≤20.0 μg/g，Pb≤5.0 μg/g，Cr≤2.0 μg/g[14]。依据以上标准，甘肃产肉苁蓉及其饮片样品中各重金属元素及重金属总量均符合规定。此外，肉苁蓉药材加工成饮片后，Cr含量从0.043μg/g 下降至0.012μg/g，Pb 含量从2.173μg/g下降至1.860μg/g，而Cu含量从5.225μg/g下降至7.656μg/g。这表明在中药的加工过程会对原料药中重金属的含量造成影响，有部分重金属含量下降，当时有些重金属含量仍有上升，这为肉苁蓉药材的加工提供一定的数据参考。参考文献[1] 刘鹏，刘华. 肉苁蓉研究进展[J]. 宁夏农林科技，2019，60（11）：9-12，56.[2] 成喜雨，郭斌，倪文，等.电感耦合等离子体-原子发射光谱法测定不同产地丹参中微量元素[J]. 北方药学，2020，29（1）：51-54.[3] 蔡鹏，常相伟，朱琼. 肉苁蓉研究进展[J]. 天然产物研究与开发，2005，17（2）：235-222.[4] 李祥溦，李喆，任晓航，等. 肉苁蓉微型饮片切制工艺优化[J]. 中成药，2019，11（2）：459-463.[5] 蔡鹏，常相伟，朱琼. 电感耦合等离子体-原子发射光谱法测定不同产地丹参中微量元素[J]. 北方药学，2020，29（1）：51-54.[6] 李春盈，张玉英. 植物类中药材及饮片中18 种重金属及有害元素研究[J]. 分析测试学报，2016，35（12）：1634-1638.[7] Jie Ouyang，Xiaodong Wang，Bing Zhao，et al. 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摘 要　目的：HPLC测定在液氮条件研磨以及在自然风干条件下研磨不同种肉苁蓉中松果菊苷的含量，比较野生肉苁蓉和人工培养的肉苁蓉中松果菊苷含量。方法：采用日本岛津LC-20A高效液相色谱仪测定。色谱柱为YMC-Inertsil ODS-SP(4.6 mm×150 mm，5μm；YMC Co Ltd，Japan)；流动相：乙腈-甲醇-1%甲酸（10∶15∶75）；检测波长334 nm；流速0.7 mg·mL-1。柱温30 ℃。结果：处理条件的不同对松果菊苷含量有非常明显影响，液氮条件下研磨的肉苁蓉中松果菊苷的含量普遍高于自然风干条件下研磨的肉苁蓉；野生肉苁蓉的有效成分含量要远高于人工培养。关键词　肉苁蓉；松果菊苷；高效液相色谱法肉苁蓉（Herba Cistanches Y.C.Ma）又称红柳、大芸，属于濒危物种，是一种寄生在沙漠树木梭梭、红柳根部的寄生植物。在我国主要分布于内蒙古、宁夏、甘肃和新疆，素有“沙漠人参”之美誉，具有极高的药用价值。中国药典规定，以列当科植物肉苁蓉的干燥带鳞片肉质茎入药，其主要药用成分有苯乙醇苷类，根据其取代基的不同可分为松果菊苷、类叶升麻苷、肉苁蓉苷等。其中，松果菊苷（Echinacoside）具有改善性功能、抗氧化和清除自由基作用，而且具有一定的抗凋亡作用。20世纪80年代以来，高速液相色谱技术（HPLC）广泛应用于天然产物的分离中，这种技术为苯乙醇苷类化合物的分离提供了一种简单快速的方法。选择采用HPLC法，分析不同生长时期野生肉苁蓉和人工栽培肉苁蓉主要有效成分松果菊苷的含量，为合理开发和利用肉苁蓉及有效评价肉苁蓉的质量提供一定科学依据。仪器与试剂日本岛津LC-20A高效液相色谱仪，LC-20AT串联双柱塞泵，CTO-20A柱温箱，SPDA-20A紫外可见双波长检测器；昆山KQ-100型超声波清洗器；乙腈（色谱纯，天津光复化工研究所）；甲醇（色谱纯，天津光复化工研究所）；甲酸（色谱纯，天津光复化工研究所）；水（屈臣氏蒸馏水）。对照品：松果菊苷，含量≥98.43%（上海原叶生物科技有限公司）。肉苁蓉样品5种：人工鲜一年期以下（未出头）肉苁蓉，人工鲜（出头）肉苁蓉，人工干肉苁蓉，野生鲜肉苁蓉，野生三年期以上干肉苁蓉。方法与结果　色谱条件的确定为使所测松果菊苷在液相色谱图中的峰与其他物质分离，以及控制泵压、时间能在合适的范围内，对色谱的条件进行了实验改进，经流动相的优化实验得出结论：温度越高，液相的保留时间越短，浓度越低，泵压越小且保留时间变短，但峰高变低，不利于测量。根据室温、泵的最大承压等客观状况，最终确定以流动相为乙腈-甲醇-1%甲酸（10:15:75）、检测波长334 nm、流速0.7 mL/min、柱温30 ℃的条件进行分析，得到的信息较为丰富，各成分峰形尖锐而且分离度良好。　色谱柱的确定色谱柱：YMC-Inertsil ODS-SP(4.6 mm×150 mm，5 μm；YMC Co Ltd，Japan)。　实验溶液制备 标准品溶液的制备精密称取松果菊苷标准品适量，加流动相乙腈-甲醇-1%甲酸（10:15:75），分别制成0.06 mg·mL-1、0.05 mg·mL- 1、0.04 mg·mL- 1、0.03 mg·mL- 1、0.02 mg·mL-1、0.01 mg·mL-1和0.005 mg·mL-1的松果菊苷标准品溶液。供试品溶液的制备取适量的人工一年期以下（未出头）鲜肉苁蓉、人工鲜肉苁蓉、野生鲜肉苁蓉用研钵在液氮下研磨成粉末；同样再取适量的上述3种肉苁蓉切成块状，在阴凉通风处自然风干，干燥后，将其粉碎研磨成粉末状。人工干肉苁蓉及野生三年期以上干肉苁蓉直接粉碎研磨成粉末状。取上述制的肉苁蓉粉末（过100目筛）0.5 g，置于离心管中，加入流动相25 mL，称重后浸泡30 min，超声处理40 min，冷却后再称定重量，用流动相补足缺失的重量，摇匀后离心，取上清液用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。松果菊苷标准样品回归曲线的绘制将配制好的松果菊苷标准样品分别注入液相色谱仪，以对照品的浓度（mg·L-1）为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线图，得到回归方程为Y=66 867 100X-46 360.83，R2=0.986 37，显示松果菊苷在0.1~1.2μg内呈良好线性关系。　样品测定按照2.3所示方法，制备样品液，然后在色谱条件项下测定，标样及样品的HPLC图谱见图1。各样品中松果菊苷的含量见表1。讨论松果菊苷是肉苁蓉主要的有效成分之一，松果菊苷能够很好地代表肉苁蓉药理作用的化学物质基础，使药材的质量评价和其药理作用相对应，提高肉苁蓉质量评价的针对性。处理条件的不同对松果菊苷含量有明显的影响，在液氮条件下研磨的肉苁蓉要比在自然风干条件下研磨的肉苁蓉中松果菊苷的含量普遍都高。普通的风干会降低松果菊苷的含量，可能是在风干过程中损耗或是松果菊苷发生了转化。为防止有效成分含量减少、保证肉苁蓉药效，应选取合适的处理方法。一直以来，大部分人认为肉苁蓉的人工栽培环境以及生长习性与野生品没有明显区别，质量也相差无几，往往只重视产量，并未对质量进行分析。本研究表明，人工栽培的肉苁蓉松果菊苷的含量低于野生肉苁蓉松果菊苷的含量。最高的为野生鲜肉苁蓉0.336 0%，含量最低的是人工鲜肉苁蓉0.007 0%。因此在栽培技术上仍需研究，提高有效成分的含量。肉苁蓉质量的好坏取决于其有效成分松果菊苷含量的多少，而有效成分又与采收的季节、时间、方法有很大的关系，所以肉苁蓉的采收应该考虑有效成分的积累状态和生长发育阶段。既考虑质量，又考虑产量。本方法测定松果菊苷的含量，简便、精密度高、重复性好，结果准确可靠。可用于肉苁蓉药材的含量测定。参考文献：[1] 雷载权.中药学[M].上海:上海科学技术出版社,2001.[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[M].北京:化学工业出版社,2000.[3] 吴培培,闫明,霍仕霞.苯乙醇苷类化合物的药理研究进展[J].医药导报,2006,30(3):142-143.[4] 蒲小平,李晓蓉,李慧浓,等.肉苁蓉成分campneosideⅡ对神经毒索MPP+诱发细胞凋亡的保护作用[J].北京大学学报(医学版),2001,33(3):217-220.[5] Lei L, Yang F, Zhang T, et al. Ito. preparative isolationand Purification of Acteoside and 2’-acety-lacteosidefrom Cistanches Salsa (C.A.Mey.)G.Beck by High-speedCounter-current Chromatography[J].J. Chromatogr. A.,2001,912:181-185.[6] Li L, Tsao R, Liu Z, et al. Isolation and Purification ofActcoside and lsoacteoside from Plantago Psyllium L,byHigh-speed Counter-current Chromatography[J].J.Chromatogr. A.,2005,1063(1):161-169.

德赢vwin登录 为列当科植物德赢vwin登录 [Cistanche tubulosa（Schenk）R. Wight]的干燥带鳞叶的肉质茎，性温、味甘咸，为补肾壮阳、润肠通便之要药，是中亚地区及新疆特有的药用植物，主要分布于南疆塔克拉玛干沙漠边缘地区[1]。德赢vwin登录 收载于2015 年版《中国药典》（一部）[2]，其主要功能成分为苯乙醇苷类化合物[3]。近年来研究发现，德赢vwin登录 中的苯乙醇苷类化合物在神经保护[4]和延缓神经退行性疾病[4-5]方面具有良好的开发前景，现已成为研究的热点之一。毛蕊花糖苷为苯乙醇苷类化合物中的活性成分之一，本课题组前期药效评价实验结果表明，毛蕊花糖苷对神经细胞具有保护作用[4]、对东莨菪碱所致小鼠学习记忆获得性障碍具有改善作[5]、对D-半乳糖致衰老模型小鼠的氧化损伤具有抑制作用[6]。毛蕊花糖苷在德赢vwin登录 中的提取工艺，为该药材的深入开发和综合利用提供参考。方法：采用高效液相色谱法对德赢vwin登录 中的毛蕊花糖苷进行含量测定。色谱柱为Inertsil-ODS-3V，流动相为甲醇-0.2％甲酸水溶液（40 ∶60，V/V），流速为1 mL/min，柱温为30 ℃，检测波长为330 nm，进样量为10 μL。以毛蕊花糖苷的提取率为考察指标，分别对浸泡时间、乙醇浓度、液料比、提取时间、提取次数进行单因素试验；根据上述试验结果采用Box-Behnken 响应面法对乙醇浓度、液料比、提取时间等条件进行优化，并对优化后的提取工艺进行验证试验。结果：毛蕊花糖苷检测质量浓度的线性范围为18.65～932.4 μg/mL。最优提取工艺为乙醇浓度63％、液料比8 ∶1（mL/g）、浸泡2 h、提取时间1.5 h、提取2 次。3 次平行验证试验所得毛蕊花糖苷的提取率分别为78.21％、76.95％、79.34％，与预测值76.76％的相对误差分别为1.89％、0.25％、3.36％。结论：优化所得德赢vwin登录 中毛蕊花糖苷的提取工艺稳定、可行，适用于该化合物的提取。关键词德赢vwin登录 ；毛蕊花糖苷；响应面法；Box-Behnken 设计；提取工艺；优化含量约为0.05～8％[7]，对其进行开发利用具有很大的药用前景。药效学实验表明，毛蕊花糖苷具有多靶点作用，有望开发成保护脑神经、改善记忆的脑病药物[8-9]。Box-Behnken 响应面设计法是可靠的实验设计以及分析方法，可通过对过程的回归拟合和响应曲面、等高线的绘制来计算出响应于各因素水平的响应值，是解决多变量问题的一种有效的统计方法[10]。鉴于此，本研究采用该法优化德赢vwin登录 中毛蕊花糖苷的提取工艺，为德赢vwin登录 的深入开发和综合利用提供参考。1 材料1.1 仪器LC-20AT型高效液相色谱仪，包括LC-20AB型二元泵、SPD-M20A型二极管阵列检测器、CBM-20A型系统控制器、CTO-20A型柱温箱、SIL-20A型自动进样器（日本Shimadzu 公司）；SQP-QUINTIX 35-1 CN型万分之一分析天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]；DZTW型恒温电热套（北京市永光明医疗仪器有限公司）。1.2 药品与试剂德赢vwin登录 炮制片（新疆维吾尔自治区和田苁蓉堂2015 年秋收炮制片，批号：20150806，毛蕊花糖苷含量：≥3.79％；将德赢vwin登录 炮制片用药锤敲碎，粉碎机粉碎后过四号筛，即得德赢vwin登录 粉末，备用）；毛蕊花糖苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：111530-201208，纯度：92.5％）；甲醇为色谱纯，甲酸、乙醇等为分析纯，水为纯化水。2 方法与结果2.1 毛蕊花糖苷的含量测定采用高效液相色谱法（HPLC）测定。2.1.1 色谱条件色谱柱：Inertsil ODS-3V（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.2％甲酸水溶液（40 ∶60，V/V）；流速：1 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：330 nm；进样量10 μ L。在上述色谱条件下取“2.1.2”“2.1.3”“2.1.4”项下溶液进样测定，色谱图见图1。2.1.2 对照品溶液的制备取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，置于10 mL棕色量瓶中，加50％甲醇溶解并稀释至刻度，得每1 mL含毛蕊花糖苷0.932 4 mg的对照品溶液。2.1.3 供试品溶液的制备准确称取德赢vwin登录 粉末100 g，按液料比8 ∶1（溶剂体积∶粉末质量，mL/g，下同）加入63％乙醇，浸泡2 h，然后置于100 ℃恒温水浴锅中回流提取2 次，每次1.5 h，趁热滤过，放冷，合并提取液，精密量取提取液1 mL至25 mL量瓶中，加50％甲醇定容，即得。2.1.4 阴性对照溶液的制备分别以50％甲醇与63％乙醇作为阴性对照溶液。2.1.5 方法学考察精密量取“2.1.2”项下对照品溶液0.2、0.5、1、2、3、5、10 mL，分别置于10 mL 量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，按“2.1.1”项下色谱条件测定。以对照品溶液质量浓度（x）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为y＝19 952x－218 412（r＝0.999 8），表明毛蕊花糖苷检测质量浓度的线性范围为18.65～932.4 μg/mL。以信噪比10 ∶1、3 ∶1 测得定量限、检测限分别为0.229 6、0.071 8 μg/mL。方法学考察结果显示，精密度[毛蕊花糖苷峰面积的RSD为0.57％（n＝6）]、稳定性[毛蕊花糖苷峰面积的RSD为1.38％（n＝6）]、重复性[毛蕊花糖苷峰面积的RSD为0.87％（n＝6）]、加样回收率[毛蕊花糖苷低、中、高质量浓度的平均加样回收率依次为99.6％、100.5％ 、100.7％ ，RSD 分别为2.55％ 、0.83％ 、0.44％（n＝9）]均符合2015年版《中国药典》（四部）要求[11]。2.2 提取方法准确称取德赢vwin登录 粉末，按一定液料比加入适宜浓度的乙醇，浸泡一定时间后，置于100 ℃恒温水浴锅中回流提取数次，趁热滤过，放冷，合并提取液，精密移取提取液1 mL至25 mL 量瓶中，以50％甲醇定容后，取样10 μL，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，按标准曲线法计算毛蕊花糖苷含量。另取德赢vwin登录 粉末，采用2015 年版《中国药典》（一部）项下方法[2]进行含量测定，并通过以下公式计算毛蕊花糖苷提取率[12]：提取率（％）＝{[提取液体积（mL）×提取液含量（mg/mL）]/[药材质量（g）×药材含量（mg/g）]}×100％。2.3 单因素试验在德赢vwin登录 苯乙醇苷类成分乙醇回流提取的过程中，浸泡时间、乙醇浓度、提取时间、液料比、提取次数等因素对提取效果有重要影响[13-14]。因此本研究以毛蕊花糖苷提取率为考察指标，对上述因素进行考察。2.3.1 浸泡时间称取德赢vwin登录 粉末100 g，共5 份，固定提取时间为1 h、液料比为10 ∶1、溶剂浓度为60％、提取次数为1 次，分别对浸泡时间0、2、8、12、24 h 进行考察，结果见图2A。由图2A可见，当浸泡时间≥2 h，毛蕊花糖苷的提取率基本趋于稳定，综合考虑提取效率，最终确定最佳浸泡时间为2 h。2.3.2 乙醇浓度称取德赢vwin登录 粉末100 g，共4 份，图1 高效液相色谱图固定提取时间为1 h、液料比为10 ∶1、浸泡时间为2 h、提取次数为1 次，分别对提取溶剂水、40％乙醇、60％乙醇和80％乙醇进行考察，结果见图2B。由图2B 可见，当乙醇浓度为60％时，毛蕊花糖苷的提取效果最好；提高乙醇浓度至80％时，毛蕊花糖苷的提取效率反而下降，故选择乙醇浓度50％～70％进行后续试验。2.3.3 提取时间称取德赢vwin登录 粉末100 g，共4 份，固定液料比为10 ∶1、乙醇浓度为60％、浸泡时间为2 h、提取次数为1 次，分别对提取时间1、1.5、2、2.5 h 进行考察，结果见图2C。由图2C可见，随着提取时间延长，毛蕊花糖苷提取率先增大后减小，于1.5 h 达到峰值，故选择提取时间1～2 h进行后续试验。2.3.4 液料比称取德赢vwin登录 粉末，100 g，共4 份，固定提取时间为1.5 h、乙醇浓度为60％、浸泡时间为2 h、提取次数为1 次，分别对液料比6 ∶1、8 ∶1、10 ∶1、12 ∶1 进行考察，结果见图2D。由图2D 可见，当液料比为8 ∶ 1时，毛蕊花糖苷的提取率最高；随着液料比增加，毛蕊花糖苷提取率先增大后减小，故选择液料比6 ∶1～10 ∶1 进行后续试验。2.3.5 提取次数称取德赢vwin登录 粉末100 g，共4 份，固定液料比为8 ∶1、乙醇浓度为60％、浸泡时间为2 h、提取时间为1.5 h，分别对提取次数1、2、3、4 次进行考察，结果见图2E。由图2E 可见，提取2 次后毛蕊花糖苷的提取率为73.57％，提取第3 次与第4 次时毛蕊花糖苷提取率基本不变，考虑工艺的成本，最终确定最佳提取次数为2 次。由上述单因素试验结果可知，浸泡2 h 以后，延长浸泡时间所得毛蕊花糖苷的提取率基本保持不变；提取2次以后，增加提取次数所得提取率亦基本保持不变。故从节约能源与缩短试验周期的角度考虑，未将浸泡时间与提取次数作为后续优化因素。2.4 Box-Behnken响应面试验2.4.1 Box-Behnken 试验设计在单因素试验的基础上，选择乙醇浓度（A）、液料比（B）、提取时间（C）为考察因素，采用3 因素3 水平的响应面法进行试验。因素与水平见表1，试验设计与结果见表2。2.4.2 模型建立与方差分析通过Design-Expert 8.0.5软件对上述试验结果进行多元二次回归拟合，得到回归方程：毛蕊花糖苷提取率（Y）＝75.86+5.38A+1.38B－0.58C + 0.18AB + 0.57AC + 0.57BC － 9.00A2 － 5.26B2 －2.50C2（r＝0.993 3）。r＞0.09 提示该模型拟合度较好，预测性较好[15]。对该模型进行方差分析，结果见表3。根据表3 中F 的大小，推测影响本试验提取率大小的影响因素为乙醇浓度＞液料比＞提取次数，所建模型经检验具有显著性（P＜0.000 1），说明模型与实际情况吻合良好；模型失拟项检验不具有显著性（P＝0.671 5＞0.05），说明未知因素对模型拟合结果的干扰少，模型误差较小；可用该模型较好地描述各因素与响应值之间的真实关系。因此，可用该模型预测毛蕊花糖苷的提取工艺条件。2.4.3 响应面图与等高线图分析分别以乙醇浓度（A）、液料比（B）、提取时间（C）为响应因子，以毛蕊花糖苷提取率为响应值，使用Design-Expert 8.0.5软件绘制乙醇浓度和液料比的交互作用对毛蕊花糖苷提取率的影响如图3A、3B 所示，固定液料比，乙醇浓度在50％～62.96％范围内，毛蕊花糖苷的提取率逐渐增高，当乙醇浓度超过62.96％时，毛蕊花糖苷的提取率降低，当固定乙醇浓度时，毛蕊花糖苷的提取率随着液料比的增加，先增大后减小；图3B等高线图表明，乙醇浓度和液料比之间的交互作用显著。乙醇浓度和提取时间的交互作用对毛蕊花糖苷的提取率影响如图3C、3D所示，固定乙醇浓度，提取时间在1～2 h 的范围内毛蕊花糖苷的提取率先升高后下降，提取率最高点对应的提取时间为1.47 h；图3D等高线图表明，乙醇浓度和提取时间交互作用显著。提取时间和液料比的交互作用对毛蕊花糖苷的提取率影响如图3E、3F 所示，固定提取时间，液料比在6 ∶1～10 ∶1 的范围内毛蕊花糖苷提取率先增高后下降，提取率最高点对应的液料比为8.26 ∶1；图3F 等高线图表明，液料比和提取时间之间的交互作用显著。根据以上结果，运Design-Expert 8.0.5 软件优化所得的毛蕊花糖苷提取最佳工艺为乙醇浓度62.96％、液料比8.26 ∶ 1、浸泡时间2 h、提取时间1.47 h、提取2次。在此条件下毛蕊花糖苷提取率的预测值为76.76％。考虑到试验的便捷性、可行性与可操作性，笔者对预测的工艺参数进行微调，选择工艺参数为乙醇浓度63％、液料比8 ∶1、浸泡时间2 h、提取时间1.5 h、提取2 次。2.5 验证试验取德赢vwin登录 粉末100 g，共3 份，进行验证试验。结果，3 次验证试验毛蕊花糖苷提取率的RSD为1.20％（n＝3），实测值与预测值的相对误差分别为1.89％、0.25％、3.36％，表明方程与真实试验情况拟合较好，优化的工艺可靠、可行，详见表4。表4 验证试验结果3 讨论响应面法是通过一系列确定性的试验，拟合一个响应面来模拟真实极限状态的曲面图，其基本思想是假设一个包括一些未知参量的极限状态函数与基本变量之间的解析表达式来代替实际不能明确表达的结构极限状态函数[16-20]。而传统数理统计不能在已有“点”数据基础上对整体的“面”数据进行预测。因此，传统数理统计具有一定的局限性[17]。利用响应面设计试验，根据Box-Behnken 的中心组合试验设计原理来寻求最优的考察因素和响应值来避免传统数理统计存在的问题，最终精确找到最佳点并灵敏地考察各因素间的交互作用[17-22]。有关德赢vwin登录 中总苯乙醇苷类化合物的提取工艺报道较多[23-24]，但对于因素的优化均采用正交试验方法进行，因此本文采用Box-Behnken 响应面分析法对德赢vwin登录 中毛蕊花糖苷的提取工艺进行研究。本研究选择浸泡时间、乙醇浓度、液料比、提取时间、提取次数等进行单因素试验，并从中筛选对提取率影响较明显的3 个因素（即乙醇浓度、液料比、提取时间）及相应水平，运用3 因素3 水平的响应面分析法进行最佳提取工艺筛选。该方法获得拟合程度较高的数学模型，交互作用结果表明乙醇浓度、提取时间和液料比对毛蕊花糖苷提取率的影响并非简单的线性关系。在乙醇浓度考察中，乙醇浓度至80％时毛蕊花糖苷的提取效率反而下降的原因，笔者认为，一方面，当乙醇浓度达到50％～70％时，药物在该溶剂中的溶解度最高；另一方面，可能是由于“相似相溶”原理，60％乙醇的极性与毛蕊花糖苷极性相近[25]。在提取时间考察中，随着提取时间的延长，毛蕊花糖苷提取率反而下降，可能与毛蕊花糖苷发生降解有关。在提取液料比考察中，毛蕊花糖苷提取率的变化与其向溶剂扩散有关。当液料比低于6 ∶1 时，两相界面间的浓度差较小，不利于成分扩散；当液料比大于8 ∶1 时，受到已提成分对未提成分协同浸提作用的影响，提取率反而降低；当液料比大于10 ∶1时，成分质量浓度下降，不利于协同浸提，毛蕊花糖苷提取率反而降低[25-26]。最终获得的最佳工艺参数为乙醇浓度63％、液料比8 ∶1、提取时间1.5 h，并通过验证试验证明了工艺的可行性。本工艺所用乙醇浓度为63％，浓度较低，可节省生产成本；同时，与其他提取方法[27-28]相比，具有更好的可重复性；此外，回流提取法简便易行，可作为进一步扩大生产的依据。综上所述，本研究优化所得德赢vwin登录 中毛蕊花糖苷的提取工艺稳定、可行，适用于该化合物的提取。参考文献[ 1 ] 郭元亨.荒漠肉苁蓉资源的综合利用[D].北京：中国科学院大学，2017.[ 2 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].2015 年版.北京：中国医药科技出版社，2015：135-136.[ 3 ] 王金芳.肉苁蓉不同部位苯乙醇苷类成分的定性定量研究[D].北京：北京协和医学院，2014.[ 4 ] 白鹏，彭晓明，高莉，等.类叶升麻苷对冈田酸诱导的阿尔茨海默病细胞模型的保护作用研究[J].中国中药杂志，2013，38（9）：1323-1326.[ 5 ] 林娟，高莉，霍仕霞，等.类叶升麻苷对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的改善作用[J]. 中国中药杂志，2012，37（19）：2956-2959.[ 6 ] 高莉，林娟，张富春，等.类叶升麻苷对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的研究[J].中国药理学通报，2013，29（10）：1440-1443.[ 7 ] 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  中药肉苁蓉抗肿瘤的研究 肉苁蓉最早载于《神农本草经》，归肾经，味甘、咸，性温，其药性温和，补而不峻，具有温肾填精、润肠、抗氧化、提高免疫力的功能，为滋补上品[27]。现代研究发现， 肉苁蓉所含的成分有苯苷类（主要）、多糖类、环烯醚萜、木脂素等 120 余种化合物[28]， 随着对其有效成分及作用机制不断的挖掘，发现其不仅有保肝、抗氧化、提高免疫力、延缓衰老、抗病毒、降糖、抗凝等作用外，还具有抗肿瘤活性，在肿瘤化疗中具有增效减毒的作用[29-30]。本研究发现药物干预后各组细胞凋亡率增加，且与肉苁蓉灌胃浓度呈正相关（P＜ 0.01），说明肉苁蓉可通过促进骨肉瘤细胞凋亡起到抗肿瘤作用，与本研究结果一致， Jinyu Li 等[31]通过体内试验发现肉苁蓉苯乙醇苷（CTPG）可通过诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞提高黑色素瘤荷瘤小鼠生存期，发现 CTPG 可上调小鼠 BAX 并下调 BCL-2 的表达，从而提高了肿瘤小鼠的存活率。就肉苁蓉抗肿瘤的研究，张洪泉等[32]早在 1988 年报道了肉苁蓉水提物具有改善小鼠免疫能力及提高腹腔吞噬细胞能力，同时能够激发小鼠的免疫功能器官如胸腺的发育。后续研究发现，肉苁蓉多糖能通过增小鼠组织内端粒酶活性改善衰老和免疫功能[33]，此研究结果与谢岚等[34]的报道一致，且发现肉苁蓉多糖具有抗氧化、改善脾虚、促进造血等功能。此外，张涛等[35]研究发现肉苁蓉有效成分总苷类化合物可提高 D-半乳糖衰老小鼠模型的免疫能力。另外，张洪泉等[36]首次报道了肉苁蓉多糖的抗肿瘤作用，发现其通过促进自然杀伤细胞（NKC）及白介素-2（IL-2） 的活性增强小鼠 Lewis 肺癌和小鼠 S180 肉瘤的抑制率。胡琼等的研究表明[37]，肉苁蓉苯乙醇总苷（CPhGs）可增强脾脏指数、降低肝脏指数(P 均<0.01)，提高荷瘤小鼠的免疫功能，同时，CPhGs 可降低 H22 荷瘤小鼠甲胎蛋白及TNF-α的含量、升高 IL-2 活性， 具有良好的抗肝癌作用。由此可见，肉苁蓉有效成分多糖、苯乙醇苷及苯乙醇总苷有明确的抗肿瘤作用。此外，有研究称[38]，肉苁蓉可对增强化疗荷瘤小鼠的造血和免疫功能，其能改善化疗药物 5-氟尿嘧啶所致的造血功能低下，同时还可提高胸腺和脾脏指数及NK 细胞活性。同时研究发现[12]肉苁蓉与环磷酰胺联应合用可增强环磷酰胺的抗肿瘤效果，同时减轻环磷酰胺引起的免疫功能缺陷与骨髓抑制，起到了增效减毒作用。由此可见，肉苁蓉有效成分具有明确的抗肿瘤作用，主要可通过增强自身免疫能力、诱导癌细胞的凋亡来实现的。 化疗在 OS 治疗中的应用OS 最常见于儿童及青少年，病死率较高，易复发、转移，最长见于生长活跃的四肢长骨干骺端[1]。近年来，在新辅助化疗联合手术治疗的理念下 OS 患者 5 年生存率提升至约 70%[3]。过去的理念认为截肢是 OS 患者的主要治疗办法，在新辅助化疗应用于OS 的保肢手术理念后大大的提高了 OS 患者 5 年生存率以及无事件生存率（EFS），术前及术后的化疗在一定程度上决定了 OS 患者保肢手术中的成功率，旨在最大范围切除肿瘤、减少术后复发。其主要的作用可概括为三点[39-40]：①杀灭肿瘤细胞，缩小瘤体， 使肿瘤边界明确，最大程度的有利于手术完整切除；②杀灭远端微小转移病灶及跳跃灶肿瘤细胞，降低术后远端转移几率；③化疗可激活某些抑癌基因及降低 OS 组织恶性分子的表达。因此，在综合 OS 患者耐受化疗药物副反应的前提下，OS 治疗成败的关键点即化疗的有效性与外科手术的完整切除率。目前，OS 临床一线化疗方案有四种，主要应用于肺转移的 OS 患者。有研究发现针对无转移可外科手术切除的 OS 患者，四药联合方案（甲氨蝶呤、顺铂、多柔比星、异环磷酰胺）6 年 EFS 为 70%[41]。易生辉[42] 对新辅助化疗联合保肢术与单纯术后化疗在 OS 的治疗中的价值做了分析，发现新辅助化疗下的保肢术能明显改善患者的肢体残疾的确定，且在提升患者总体生存率中有明确的应用价值。Yu D 等[43]为了探讨 MAP 化疗方案在 OS 治疗中的价值，回顾性收集了 115 例 OS 患者的资料，通过分析患者 3 年、5 年无进展生存期（PFS）及总的生存率，发现MAP（甲氨蝶呤、阿霉素和顺铂）方案是 OS 化疗的首选方案。此外，OS 的远期疗效尚与化疗后组织病理学坏死率有关，Bacci 等[44]评估了 881 例无转移 OS 的患者中新辅助化疗术后肿瘤组织病理学反应率与 5 年 PFS 的关系，发现坏死率越高，5  年 PFS 越长， 此结论与 Bernthal 等[45]的研究结果一致。总之，肿瘤细胞的化疗敏感性或肿瘤组织病理学高坏死率对 OS 患者预后及生存期有着重要的临床意义，有效的化疗方案是 OS 保肢手术的有效保障，肿瘤组织对化疗药物的敏感性在一定程度上决定了 OS 治疗的有效性， 如何保障化疗药物在 OS 治疗中的高敏感性是目前亟待解决的问题。介导骨肉瘤化疗耐药产生的机制 尽管化疗药物的应用为 OS 患者的整体生存带来了革命性的改变，但耐药性的产生成为了近年来 OS 治疗成败的一大挑战。其通常与 MDR 机制关系密切，MDR 的产生使得肿瘤细胞免受化疗药物攻击，是影响 OS 患者化疗效果的关键因素，该过程的产生是一个多阶段、多因素协调下的复杂过程。ABC 跨膜转运系统调控着多种肿瘤的耐药进程，本研究选取其成员蛋白 P-gp、MRP1 两个最常见的耐药介导蛋白为研究靶点。 ABC 跨膜蛋白介导的肿瘤细胞耐药ABC 跨膜转运系统功能异常与化疗药物的耐药性产生有着密切的关联，目前发现有 48 个成员，研究较多的有 P-gp、MRP1、BCRP [8-9]。P-gp 被认为是目前肿瘤细胞产生耐药性的主要介导蛋白，当脂溶性的抗肿瘤药物进入细胞内后，高表达的 P-gp 会通过跨膜通道将药物泵出胞外[46]，使胞内抗肿瘤药物如甲氨蝶呤等无法达到有效作用浓度，进而产生化疗抵抗现象。MRP 与 P-gp 相似，都具有“泵药”功能，且依赖能量作为催化剂将将细胞内药物排出，此外，MRP 还可识别并排除谷胱苷肽(GSH)与抗肿瘤药所反应产生的底物，从而导致肿瘤细胞耐药[47]。BCRP 除介导着化疗药物的耐药外，同时还参与着肿瘤细胞的靶向治疗耐药、激素治疗不敏感、放疗抵抗等有关，其主要的底物是长春新碱等[48]。  酶系统介导的相关耐药多种酶参与介导着肿瘤细胞化疗耐药的产生过程，如谷胱甘肽 S 转移酶(GST)、拓朴异构酶 II(TOPO Ⅱ)、蛋白激酶 C(PKC)等均可通过自身功能发挥介导肿瘤细胞耐药的作用[47]。GST 是具有氧化性质的酶，可直接作用于脂质过氧化物而降低其细胞毒性作用， 同时，GST 可催化烷化剂、铂类抗肿瘤药物与 GSH 形成复合底物，使药物失活，从而发生介导肿瘤细胞的耐药作用[49]；TOPO Ⅱ在 DNA 复制、转录、断裂和再连接过程中发挥重要功能，其主要通过干扰基因复制及表达而杀死肿瘤细胞，当 TOPO Ⅱ基因位点发生突变或 TOPO Ⅱ出现高度磷酸化均可导致化疗药物的低敏感性[50]；PKC 可加速MRP1 和 P-gp 的磷酸化介导肿瘤细胞的耐药 。 DNA 损伤修复介导的肿瘤耐药OS 化疗药物顺铂、环磷酰胺可通过损伤肿瘤细胞 DNA 发挥抗肿瘤作用，然而该过程可激活细胞周期调控点，通过暂时的细胞周期停滞并进行 DNA 自我修复来逃避药物对自身的损害[51]，目前公认的 DNA 损伤修复机制主要包括：①DNA 碱基切除的修复；②DNA 错配修复；③DNA 双键断裂的修复；④DNA 核苷酸切除修复[52]。上述四种途径的异常增强均可导致化疗药物的减效或失效，即肿瘤细胞对化疗药物的产生耐药。多种分子、基因通过参与上述途径调控肿瘤细胞耐药，如 DNA 修复蛋白 Rad51 通过修复DNA 双键断裂从而导致耐药[53]，脱嘌呤（AP）/核酸内切酶(APE1)、N-甲基嘌呤-DNA糖基化酶(MPG)可通过修复碱基切除使肿瘤细胞产生耐药性[54]。自噬介导的耐药自噬受多种自噬基因调控，也称Ⅱ型程序性死亡，有研究发现抑制或激活肿瘤细胞自噬可以促进肿瘤细胞凋亡，显著增强化疗效果[55]。自噬通过介导细胞因子 mTOR、H MGB、Beclin-1、miRNA 等辅助清除受损的蛋白质和细胞器从而促进肿瘤的生长，有研究表明，当化疗药物作用于肿瘤细胞时，自噬介导的相关因子可抵抗肿瘤细胞凋亡，降低细胞毒性作用从而导致细胞耐药[56]。总之，骨肉瘤化疗耐药性的产生主要由 ABC 转运蛋白为主的跨膜蛋白家族、介导细胞解毒的酶系统、自噬、DNA 损伤修复介导，此外还与某些 miRNA、信号通路及细胞微环境相关。 反义寡聚核苷酸逆转技术针对 OS 耐药性产生的机制，目前逆转 OS 耐药性的手段主要有三大类：基因疗法、曾敏化疗法及中医药疗法。逆转肿瘤耐药的基因疗法主要有反义寡聚脱氧核糖核苷酸（ASODN）逆转、RNA干扰技术逆转及核酶技术逆转。ASODN逆转技术主要是通过ASODN与靶向 RNA 互补结合，从而干扰mRNA的翻译。Lo YL等[57]设计了MDR1基因的过反义寡聚核苷酸，选用脂质体当作载体，结果发现合用后比单独用阿霉素具更好的治疗作用，可以较好的逆转结肠癌细胞对阿霉素的耐药性。饶耀剑等[58]通过survivin 修饰反义寡聚核苷酸，通过转染MG-63细胞后，PCR 检测survivin mRNA的表达，发现survivin ASODN能够提高其对化疗药物的敏感性。目前，RNA干扰技术主要是通过抑制MDR1基因及P-gp的表达来逆转耐药的。核酶技术逆转可针对性的切断靶基因的mRNA，较成熟的观点是切断MD R基因的mRNA，从而实现逆转耐药[59]。 增敏化疗逆转剂增敏化疗法主要是针对耐药产生的机制如膜转运蛋白的异常表达、酶系统异常表达及 DNA 损伤修复等为靶点逆转耐药。ABC 膜转系统中参与化疗耐药产生的蛋白主要有P-gp，主要由 MDR1 基因编码。维拉帕米与环孢素是经典的 P-gp 抑制剂，可竞争性与P-gp 结合达到逆转的目的，但临床报道心脏毒副反应较大[60]。第二代主要为钙通道阻滞剂，代表药物如维拉帕米的衍生物右旋维拉帕米、右尼古地平、伐司朴达和比立考达等， 可以与外排药物竞争并结合 P-gp，相对增加胞内的药物浓度，达到增敏化疗的作用，其药效剂毒性小且更具靶标性，但可能降低其他联合抗肿瘤药物的活性[61]。第三代药物较第一、二代药物具有更好的逆转作用，代表药物如环丙基二苯并环庚烷类、苯甲酰亚胺衍生物等。 酶系统抑制剂此类逆转剂主要是通过降低 GST、PKC、TOPII 等酶的活性起到逆转耐药的作用。如逆转 MDR 制剂依他尼酸可以抑制 GST 酶的活性，丁硫氨酸亚砜胺可抑制 GSH 活性， 逆转耐药。TOPII 抑制剂按其机制可分为 TopII 催化抑制剂及 TopoII 毒剂，目前常用药物有阿霉素为代表的蒽环类、TAS-103 为代表的喹诺酮类、吡啶类衍生物等[62]，因该类前体化合物大多溶解性低、特异性差、毒性较大，化疗患者本身免疫力差，因此临床治疗效果欠佳。PKC 抑制剂主要有 Enzastaurin、苔藓虫素、米哚妥林等[63]，具有良好的逆转耐药及增敏化疗的作用。Michaelis 等[64]研究发现 Enzastaurin 浓度在 0.3125μM 下可直接干扰 DMR1 介导的药物转运，进一步抑制 BCRP 介导的药物转运，进而逆转耐药。Mohanty 等[65]研究发现苔藓虫素可通过下调 PKC 增敏顺铂化疗效果。此外还有 DNA修复酶的抑制剂如链脲霉素、阿非迪霉素等。 中医药逆转近年来，中医药在肿瘤逆转化疗耐药及增敏化疗中取得良好的疗效。有研究表明[66]， 中药可能通过调控P-gp的表达、抑制MRP1表达、促进耐药细胞的凋亡以及Ca2+通道阻 滞作用等方式逆转肿瘤的化疗耐药，其中抑制P-gp的表达是目前中药及有效成分逆转化疗耐药的主要研究点。Shan Su等[67]发现牛蒡子提取物木脂素类化合物可通过抑制P-gp 的表达逆转人白血病CEM/ADR 5000细胞及结肠癌Caco-2细胞的耐药性。Xue GM[68]研究发现半枝莲提取物二萜类化合物也可通过下调P-gp的表达来抑制乳腺癌细胞对阿霉 素的耐药性。此外，中药苦豆子提取物黄铜类化合物、丹参有效成分隐丹参酮和二氢丹参酮、蛇床子素、姜黄素、槲皮素、三七总皂苷等[69-70]均可通过下调P-gp的表达逆转肿瘤细胞的化疗耐药性。陈英玉等[71]研究发现大黄素可下调MRP1、TOPOⅡ，增加胞内抗癌药物的蓄积，从而逆转HL-60/ADR细胞的多药耐药。朱聪等[72]研究表明龙葵碱在体外水平下调MRP1的表达，有效逆转人白血病K562/ADR细胞的多药耐药性。陆勤等[73]最 新研究发现人参皂苷Rh2能通过促凋亡作用有效逆转阿霉素对肝癌HepG2细胞的多药耐药性。人参皂甙Rb1有着与钙离子通道抑制剂类似的作用，Sadava等[74]发现人参皂甙Rb 1能够增强癌细胞对长春新碱的化疗敏感性，作用与钙通道阻滞剂维拉帕米类似。此外，某些中药及提取物可通过多种途径协同完成逆转耐药的作用，如苦参碱可通过抑制PI3 K/AKT信号途径降低P-gp、MRP1蛋白的表达，从而增加化疗药物对乳腺癌耐药细胞的化疗敏感性[75]。研究发现许多中药及提取物可有效逆转OS细胞的耐药性，其作用机制主要与抑制A BC跨膜转运系统相关膜蛋白（P-gp、MDR、BCRP）的表达、增加细胞毒性作用有关。马张稳等[76]研究发现川芎嗪对OS细胞具有细胞毒性作用，可显著抑制细胞MDR1的表 达，从而提高OS细胞化疗药物敏感性。Lu Y等[77]研究发现粉防己提取物粉防己碱可通过抑制NF-κB途径的机制抑制P-gp的过度表达逆转人骨肉瘤U-2OS细胞对紫杉醇的耐药性。肖扬等[78]研究发现中药提取物姜黄素可有效逆转人骨肉瘤U-2OS/ADM细胞对阿霉素的耐药性。李秋萍等[79]发现五味子乙素能够抑制OS耐药细胞的MDR1基因的转录， 增强药物对细胞的毒性作用，具有强大的逆转耐药的效果。总之，多种中药单体可逆转OS细胞的多药耐药，但目前研究主要集中于体外研究，体内试验研究较少，需进一步完善。  P 糖蛋白与骨肉瘤  P-gp 与肿瘤的关系P-gp是有MDR编码的分子量为170kDa的蛋白质，约包含1276-1280个氨基酸，依赖A TP产生的能量发挥其功能[80]。P-gp与转运毒物及药物等的解毒功能有关，在正常人体肝脏、肾脏、结肠、睾丸、胎盘等组织中均有表达。通常参与P-gp编码的基因包含MDR1 和MDR2两种，但编码参与药物转运相关的P-gp的基因只有MDR1及亚型，MDR2编码的P-gp主要参与转运磷脂及激素[81]。P-gp 与多种肿瘤细胞的多药耐药性的产生有关，肿瘤细胞膜表面高表达的 P-gp 能抑制抗肿瘤药物的吸收并促其外排（如蒽环类、紫杉醇、长春碱、依托泊苷），导致肿瘤细胞对抗肿瘤药的低度敏感性。综合现有研究，P-gp 参与化疗耐药途径的机制有 3 种[82]：①药物与 P-gp 直接结合并排除胞外；②抗肿瘤药与 P-gp 在脂质分子层结合，从而化疗药未进入胞内便被排出；③部分抗肿瘤药最终进入肿瘤细胞内，P-gp 会将其泵入胞质内膜腔，其出胞作用将其排出细胞。此外，P-gp 除还可通过各种方式参与肿瘤细胞的凋亡、增殖、迁移、及促进肿瘤细胞上皮间质转化等。Sugawara[83]报道在肾上腺肿瘤、胰岛素肿瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、肾细胞癌、膀胱癌组织中 P-gp 均存在高表达，与肿瘤的恶性组织学行为呈正相关。Leonard 等[84]报道了在结肠癌、肾癌、白血病和乳腺癌等恶性肿瘤化疗后肿瘤的进展与 P-gp 表达呈正相关。杨力[85]研究发现 P-gp 在 OS 组织中呈阳性表达，可作为判断 OS 性质及评估其预后的指标。因此，多种肿瘤组织内存在 P-gp 的异常表达，与肿瘤组织的恶性程度及抗肿瘤药物的敏感性密切相关。 P53 蛋白在 OS 化疗耐药中的作用P53 蛋白与多种细胞的分化、凋亡、DNA 损伤修复及各类生物学功能相关，对细胞的增值分化起到负向调控的作用 [86]。本研究在 MTX 诱导耐药过程中持续以肉苁蓉含药血清干预，空白组耐药后，通过 WB 法检测发现，肉苁蓉含药血清各组 P53 蛋白表达均下调（P＜0.05），高剂量组下调最明显（<em

若说当归是妇女“密友”,那么,肉苁蓉便是男人的“加油站”。相传,当年成吉思汗领军受困于一片梭梭树林,将士们本已筋疲力尽,谁知就地食用了一种植物块根后,神力涌现,一举得胜。这种神物,便是“来自沙漠的人参”——肉苁蓉。药材名片肉苁蓉来源:为列当科植物肉苁蓉,或德赢vwin登录 的干燥带鳞叶的肉质茎,又名大芸、寸芸、苁蓉。是寄生于沙漠树木梭梭或红柳根部的植物。分布:主要分布于内蒙古、新疆等荒漠地区。性味:甘、咸、温。用途:常用于治疗肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力肠燥便秘等。 补肾益精,还不上火肉苁蓉能助益男性,皆因其有补肾阳、益精血功效。《神农本草经》将之列为上品,《证类本草》载“养五脏,强阴,益精气”。男性如肾虚精亏,肾阳不足而致阳痿,可用肉苁蓉、韭菜籽煎水服用。 女性便吃不得吗? 其实并不是。肉苁蓉男女皆补,既可治疗男性阳痿,也可治疗女性不孕。而且,补肾而不伤阴,长期服用一般不会出现上火、口干等症状。 润肠通便,肉苁蓉膏有奇效现代认为,肉苁蓉还能润肠通便,延缓衰老。与大黄、番泻叶等泻下药不同,肉苁蓉能让大便变湿变软,易于排出,特别适合肠燥便秘的老年人、孕妇和体弱多病者。但胃肠有热者不宜食用。怎么吃呢?推荐一个方法取肉苁蓉、蜂蜜、黑芝麻、核桃仁制成蜜膏,早晚各开水冲食1~2匙。此膏有良好的滋润肠道、通导大便之功。对于年高体虚、津枯便秘者其效灵验。 药师提示煮水泡茶皆宜但这些人忌用日常保健用,肉苁蓉饮片煮水、泡茶、泡酒,或者用肉苁蓉药材蒸软,切片煮水、泡茶都是可以的。但阴虚火旺、脾虚便溏者忌用;煎煮时忌铁器。最好在执业中医师指导下使用。如何挑选肉苁蓉想服用肉苁蓉,既可以选原药材,也可以直接购买饮片。肉苁蓉原药材有这些特点：呈扁圆柱形，稍弯曲 ，长 3 ~15 厘米 ，直径 2~8厘米；表面棕褐色或灰棕色，密被 为覆瓦片状排列的肉质鳞叶；断面棕褐色 ，有淡棕色波状环纹。它主要来源于两个产地，一是内蒙古，为阿拉善肉苁蓉，二是新疆，为德赢vwin登录 。 阿拉善肉苁蓉断面围绕一圈花纹管束，质地柔软 断面为点状管束，质地坚硬新疆德赢vwin登录 ，质坚实，手握之有硬性顶  手感，口尝 较苦 。 传统认 为阿拉善肉欢蓉是最好的肉苁蓉。商品一般又分为淡苁蓉和咸苁蓉。淡苁蓉，一 般 为春夏采收，以 个大身肥、鳞细、颜色灰褐色至黑褐色、油性大、茎肉质而软者 为佳。咸苁蓉，为秋产苁蓉，常油性较大，不易干  燥，会利 用 当地的湖盐腌存。表面黑褐色，附有较多 盐霜 ，以 色黑质糯、细鳞粗条、体扁圆形者为佳。

第一章 综述        肉苁蓉自古就被视作强壮、滋补的名贵中药,素有“沙漠人参”之美誉,始载于《神农本草经》,列为上品,具有补肾阳、益精血、润肠通便、延缓衰老的功效,常用于治疗男子阳痿、女子不孕、虚寒泄泻、腰膝冷痛、血枯便秘等症。《中国药典(2015年版)部收载的肉苁蓉为列当科植物荒漠肉苁蓉 Cistanche deserticola YC.Ma和德赢vwin登录 C. tubulosa( Schenk)R. wight的干燥带鳞叶内质茎,由于当前市场流通的肉苁蓉类药材混乱,对肉苁蓉的质量控制大多只关注苯乙醇苷类化合物。为了更好地评价肉苁蓉的质量,保证药材及其产品的疗效,本文对肉苁蓉的化学成分分析和体内成分分析的研究进展一一综述,以期建立更加全面、有效的分析方法,弥补当前质量分析及体内研究的不足。 第一节  中药肉苁蓉化学成分分析研究进展自然环境以及地域条件直接影响着中药材或者制剂的质量,而中药材或者制剂的质量与临床用药的安全性息息相关,因此,为了提高肉从蓉药材或者制剂的质量控制水平建立准确、可靠以及快速的测定方法显得尤为重要。近年来,国内外学者在肉苁蓉化学成分分析方面做了大量的工作,也尝试了多种分析方法,包括指纹图谱法、比色法HPLC-DAD、 HPLC-ELSD、LCMS、GCMS、FT-BR、以及2DIR等 1.指纹图谱指纹图谱法与中药“整体性”观念一致,是鉴别中药真实性和评价其质量一致性的切实可行的质量控制方法,在国际社会上的认可度比较高。朱乃亮等利用UPLC建立荒溴内苁蓉和德赢vwin登录 药材的指纹图谱,标定了15个共有峰,鉴定其中5个共有峰,表明药典收载的两种肉苁指纹图潜具有显著区别,该方法简便,重现性好,可用于区分荒漠肉苁蓉和德赢vwin登录 药材及药材的质量评价。朱旭江等运用HPLC建立10批兰州肉苁蓉的指纹图谱,研究兰州肉苁蓉与肉苁蓉的内在质量差异。结果显示,与肉苁蓉相比,兰州肉苁蓉出现许多特征峰的缺失,特别是松果菊苷特征峰的缺失;且兰州肉苁蓉与肉苁蓉对照药材的相似度仅为0.04左右,表明兰州肉苁蓉与正品肉苁蓉存在较大的差异。马志国等叫采用HPLC建立10批沙苁蓉饮片指纹图谱,标定了7个共有峰,相似度评价结果均大于0.92,表明了沙苁蓉指纹图谱具有专属性,能为沙苁蓉饮片的质量控制提供一定的参考。熊元君等采用HPLC色谱图法,以6种苯乙醇苷类化合物为参照,建立了新疆维吾尔自治区9个不同产地德赢vwin登录 的指纹图谱和其分析方法,结果表明该方法稳定、可靠、重现性好,可以用来评价德赢vwin登录 药材的质量谢洁娜等1用 Agilent Zorbax Extend-Cn(150mmx46mm,Spm)色谱柱,以0.095%磷酸水溶液0.095%磷酸乙腈溶液为流动相线性梯度洗脱,洗脱梯度为0~18min,96%A-4%B18~40min,88%A-12%B;40~65min,85%A-15%B;65~75min,85%A-15%B;75~90min,80%A20%B;90~100min,80%A20%B;100min,96%A4%B,检测波长330m;体积流量:1mL/min;柱温为30℃。建立16批不同产地荒漠肉苁蓉的HPLC指纹图谱,结果表明不同来源的荒漠肉苁蓉药材内在质量差异较大,该方法可用于评价肉苁蓉药材的质量。屠鹏飞等采用反相高效液相色谱法对国产4种及1变种和25份商品药材肉苁蓉药材所含的苯乙醇苷类成分进行了研究,分析了它们的HPLC图谱,结果这些生药材均含有多种苯乙醇苷,其中荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉、白花盐苁蓉和德赢vwin登录 所含苯乙醇苷成分相似,而沙苁蓉与其它种差别较大,松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量以盐生肉苁蓉最高,杨瀚春等以毛蕊花糖苷为参照物,采用 Shim-pack VP-ODS色谱柱(150mm×4.6mm,5m),建立22批荒漠肉从蓉的HPLC指纹图谱分析方法,共标定出肉苁蓉药材的共有指纹峰27个。结果表明不同批次的肉苁蓉指纹图谱差异较大,表现在不同批次肉苁蓉药材的色谱峰数目、色谱峰面积都存在明显差异,相似度评价结果表明少量样品的相似度不高。杨建华等固选择 RP-HPLC建立盐生肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的指纹图谱,并进行栽培品与野生品、不同生长期、不同药用部位指纹图谱的比较研究标定了19个共有色谱峰,结果发现种植的与野生盐生肉从蓉指纹图谱有很高的相似度化学成分种类与相对含量基本稳定,不同生长期或者不同部位的指纹图谱也有较好的致性,但是特征峰的含量存在明显的差异,这种方法重现性好,可以较好地反映盐生肉从蓉特征成分的内在质量。Sh比较了荒漠肉苁蓉、德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉、沙苁蓉的HPLC指纹图谱和 SSR (inter-simple sequence repea)基因指纹图谱,结果发现两种指纹图增都能很好的对肉从药材进行区别和质量控制,而且笔者认为由于沙蓉中松果菊苷含量较低,因此,沙苁蓉不能代替荒漠肉苁蓉或者德赢vwin登录 进入药典。 Jiang等建立 HPLC-DAD-MS方法对来自不同产地的36份内苁蓉药材(包括14份荒漠肉苁蓉、14份德赢vwin登录 、2份盐生肉苁蓉以及6份沙苁蓉)指纹图谱进行分析并对其中18个苯乙醇苷类化合物进行指认。结果显示德赢vwin登录 、盐生肉苁蓉与荒漠肉苁蓉的相似度最高而沙苁蓉的相似度针低,仅为0.0532.原子吸收分光光度法随着人们对中药有效成分的全面认识,无机元素日益受到人们的重视,特别是近几年来,某些不能用传统中医理论解释的中药材功效,已经可以通过微量元素的生理作用得以解释,因此,研究肉苁蓉中微量、宏量元素及其相应的元素标定及规范化检测方法对建立、健全中药肉从蓉质量控制及安全性评价体系都具有重要意义。原子吸收分光光度法因其灵敏度高、精密度高、应用范围广、用样量小,仪器操作简便等优点逐渐成为检测无机元素的主要方法。陈卫军等叫采用湿法直接消解肉苁蓉粉末,并用火焰原子吸收法FAAS)直接测定其中的Pb、Cd和Cu,结果表明新疆3个主产地的肉苁蓉未超出限量范围,临床使用安全性较高。程齐来等采用火焰原子吸收分光光度法和石墨炉法测出荒漠内苁蓉中含有多种人体必需微量元素,这些微量元素含量从高到低的顺序依次为g、cu、Zn、Pb、S且Mg、Ca、Fe、Zn含量较高,有着重要的生理功能、营养作用和临床诊疗意义,齐誉等利用火焰原子吸收分光光度计测定新疆肉苁蓉中微量元素锰及铜的含量,并对比了干法消化、湿法消化两种样品处理方式,结果表明干法消化、湿法消化法均不影响测定的结果。